Bài giảng Giới thiệu về Rybozym

1.Giới thiệu về RybozymLà các phân tử acid ribonucleic (RNA) có khả năng tác động như các proteinTự ghép nối intron nhóm I của Tetrahymena với bán phần RNA của Rnase PCấu thành tiểu đơn vị lớn của ribosome có chức năng như là một peptidyltransferase Liên hợp với tiền RNA thông tin (pre-mRNA) để xúc tác cho sự ghép nối pre-RNACó thể là hợp chất tự nhiên hay được tổng hợp nhân tạoCác Ribozym có thể thao tác một cách dễ dàng để tác động lên các cơ chất mới Có 2 dạng ribozym xúc tác hay được dùng là:Ribozym hình cặp tóc ( hairpin)Ribozym hình đầu búa (hammerhead)2.Ứng dụng của RybozymĐược ứng dụng như các tác nhân kháng vius: ung thư, các rối loạn di truyền,chủ yếu là điều trị vius gây thiếu hụt miễn dịch ở người (HIV)Được sử dụng rộng rãi đối với các gen tế bào đích: bản sao tổng hợp bcr-abl , nhắm vào HER-2/neuCác yếu tố đòi hỏi sự di căn: chống lại CAPL/mts, metalloprotein gian bào (matric), pleiotrophin và VLA-6 integrin3.Sự chuyển giaoCơ chế chung đưa các phân tử RNA vào tế bào:Chuyển giao ngoại sinh các ribozym hình thành trước (preformed ribozym)Biểu hiện nội sinh từ một đơn vị phiên mãMột số Ribozym với bộ khung cải biến:Duy trì được đặc tính đặc hiệu vị trí và đặc tính xúc tác của các RNA chưa cải biến.Một số làm tăng đặc tính xúc tác và trở thành những ứng cử viên cho sự chuyển giao ex-vivoRibozym cải biến hóa học thể hiện khả năng chuyển giao không cần capsul hóa mà vẫn vào được tế bào.Vec-tơ retrovirusVec-tơ andenovirusAndenovirus liên hợpLentivirusVirus anphaCác hệ thống chuyển giao virus:Vec-tơ retrovirus:Vật chuyển gen thông dụng nhất trong gen trị liệu lâm sàngHợp nhất ổn định vào trong tế bào chủ đang phân chiaTạo nên dạng giả một cách dễ dàng với nhiều protein vỏCơ chế chuyển giao retrovirusVec-tơ andenovirus:Được tạo ra ở độ chuẩn cao và tải nạp rất hiệu quảKhông hợp nhất vào hệ gen vật chủSự biểu hiện của gen chuyển chỉ là tức thời trong các tế bào đang phân chia tích cựcGen trị liệu sử dụng vec-tơ andenovirusAndenovirus liên hợp:Là virus nhỏKhông gây bệnhHợp nhất một cách ổn định cào trong hẹ gen tế bào vật chủHệ virus anpha: Khi sử dụng virus Semliki Forest tảo tổ hợp đã cho hiệu ứng tải nạp cao đối với tế bào động vật Lợi thếTiềm năng cài gen đơn ổn định, khả năng nhắm đích vào các tế bào ở giai đoạn Go.Sự khả thi khi sử dụng tổ hợp mạnh promoter Tat/LTR biểu hiện gen cao.Các gen phụ trợ có thể tạo nên sự cảm ứngSự nguy hiểm của các sản phẩm tái tổ hợp của một virus hoang dại.Độ chuẩn tương đối thấpLentivirusLà phân họ của retrovirusBất lợi