Đề tài Phân tách protein bằng sắc kí lọc gel

 PHÂN TÁCH PROTEIN BẰNG SẮC KÍ LỌC GEL	Sinh viên thực hiên : Phạm Thị Trang	Lớp : Vật Lý CNTN K13	Giảng viên hướng dẫn: TS. Nguyễn Lai Thành	 TS. Hoàng Thị Mỹ NhungĐại học Khoa học tự nhiên_ĐHQG Hà NộiMôn: Vật lý sinh họcNỘI DUNGĐặc điểm chung và các phương pháp tách lọc Protein.Protein là đại phân tử,chủ yếu là dạng hình cầu và dạng sợi, lưỡng tính, không tan trong nước.Trong cấu trúc cơ thể sống hoặc trong tế bào, chứa hàng nghìn loại protein ở dưới dạng tự do hoặc kết hợp, để nghiên cứu 1 loại protein trước tiên ta phải tách lọc chúng.Dựa vào các đặc tính lý hóa, ta có các phương pháp tách lọc như: Kết tủa, thẩm thấu, sắc kí .	Khái quát về sắc kí lọc-sắc kí lọc gelSắc kí là kĩ thuật dùng để phân tách các hợp phần khác nhau của hỗn hợp, dựa trên sự di chuyển khác nhau trong pha động của các chất hòa tan trong hỗn hợp.Quá trình chung của sắc kíCột sắc kí chuẩn bị với mẫu cần phân tách, giá thể được cân bằng với dung dịch đệm. Mẫu phân tử sinh học được hòa vào dung dịch đệm và được đưa qua cộtDòng dung dịch đệm được bơm qua cột, mẫu sẽ được đẩy ra khỏi cột theo từng giai đoạn.Sắc kí lọc gel sử dụng giá thể là các hạt gel, sự phân tách dựa trên kích thước phân tử.Cơ sở và cấu tạo của sắc kí lọc gelCác bước tách lọcSơ đồ sắc kí lọc gelKẾT QUẢ Theo thời gian, ta thu được protein có kích thước nhỏ dần đi ra theo dung môiKhi dung môi chuyển động chảy qua cộtCác phân tử protein có kích thước lớn không thể đi vào bên trong lõi của hạt gel, chúng đi vào các thể tích trống giữa các hạt gel và đi ra khỏi cột trước theo dung môiPhân tử có kích thước vừa sẽ bị giữ lại một chút và đi ra chậm hơnPhân tử nhỏ sẽ khuyếch tán vào trong các hạt gel theo lỗ trên bề mặt gel, cần thời gian nhiều nhất để đẩy ra ngoài sau đó mới đi vào thể tích dung môiTHU KẾT QUẢTùy các loại protein ta chọn các gel có kích thước lỗ khác nhau.Đầu dò của tương thích với các protein cần phát hệ,biểu đồ biểu diễn sự thay đổi của tín hiệu ra theo thời gian và theo thể tích tiêu hao của pha độngƯu điểm và nhược điểm của phương pháp ƯU ĐIỂMPhương pháp đơn giản, rẻ, đồng nhấtDung dịch đệm và hat gel không tương tác gì với protein nên ảnh hưởng gì đến protein,không làm biến tính proteinDùng phương pháp ta đã tách được protein có kích thước khác nahu ra khỏi hỗn hợp NHƯỢC ĐIỂMTốc độ chậmĐộ chính xác chưa được cao,chỉ có thể tách các protein có kích thước khác nhau,còn các loại protein có kích thước giống nhau thì chưa thể phân táchTHANK FOR YOUR ATTENTION